Optimalisatie van een lumbaal IVD- degeneratiemodel bij ratten voor lage rugpijn
Inleiding: Degeneratie van de tussenwervelschijf (IVD) wordt vaak geassocieerd met lage rugpijn en uitstralende pijn in de benen. Het doel van deze studie is om een reproduceerbaar en gestandaardiseerd preklinisch mannequin van pijnlijke lumbale IVD-degeneratie te ontwikkelen door evaluatie van structurele en gedragsveranderingen als reactie op IVD-verwonding met toenemende naaldafmetingen. Dit mannequin kan worden gebruikt om nieuwe therapieën voor IVD-degeneratie te ontwikkelen.
Methoden: Vijfenveertig vrouwelijke Sprague Dawley-ratten ondergingen een voorste lumbale schijfnaaldpunctie op niveaus L4-5 en L5-6 onder fluoroscopische begeleiding. Dieren werden willekeurig toegewezen aan vier verschillende experimentele groepen: naaldgroottes van 18 Gauge (G), 21G, 23G en schijncontrole. Om de progressie van IVD-degeneratie en pijn te volgen, werden de volgende methoden gebruikt: μMRI, qRT-PCR, histologie en biologische gedragsanalyse.
Resultaten: T1- en T2-gewogen μMRI-analyse toonde een correlatie aan tussen de mate van IVD-degeneratie en naalddiameter, met de meest ernstige degeneratie in de 18G-groep. mRNA-expressie van markers voor IVD-degeneratiemarkers was ontregeld in de 18G- en 21G-groepen, terwijl pro-nociceptieve markers alleen in de 18G-groep waren verhoogd. Kleuring met hematoxyline en eosine (H&E) en Alcian Blue / Picrosirius Pink bevestigde de meest uitgesproken IVD- degeneratie in de 18G-groep. Randall-Selitto en von Frey-tests lieten een verhoogde achterpootgevoeligheid zien in de 18G-groep.
Conclusie: Onze bevindingen tonen aan dat letsel aan de voorste schijf met een 18G-naald leidt tot ernstige IVD-degeneratie en mechanische overgevoeligheid, terwijl de 21G-naald resulteert in matige degeneratie zonder verhoogde pijngevoeligheid. Daarom moeten naaldmaten worden geselecteerd afhankelijk van het gewenste fenotype voor het preklinische mannequin.
Analytische prestaties van trombospondine-1 en cathepsine D immunoassays Onderdeel van een nieuwe CE- IVD- gemarkeerde check als hulpmiddel bij de diagnose van prostaatkanker
De Prostaat Specifiek Antigeen (PSA) -test lijdt aan een lage specificiteit voor de diagnose van prostaatkanker (PCa). We hebben oorspronkelijk twee kankergerelateerde eiwitten thrombospondine-1 (THBS1) en cathepsine D (CTSD) ontdekt met behulp van een op massaspectrometrie gebaseerde proteomics-benadering. De twee serumeiwitten bleken de diagnose van hoogwaardige PCa te verbeteren. Daarom hebben we kwantitatieve ELISA’s ontwikkeld voor de bepaling van hun concentratie in menselijk serum. Hier rapporteren we hun analytische prestaties in termen van detectielimiet, specificiteit, precisie, lineariteit en interferenties, die werden bepaald op foundation van CLSI-richtlijnen. Verder onderzochten we de invloed van pre-analytische factoren op concentratiemetingen.
Hiervoor werd bloed van 4-6 donoren verzameld in verschillende buisjes en gedurende verschillende tijden bij kamertemperatuur bewaard voordat het werd gecentrifugeerd bij verschillende centrifugale krachten en temperaturen. De stabiliteit van THBS1 en CTSD onder verschillende opslagtemperaturen werd ook geëvalueerd. Onze resultaten tonen aan dat de assays specifiek, lineair en gevoelig genoeg zijn om metingen van klinische monsters mogelijk te maken.
Precisie in termen van herhaalbaarheid en totale variatiecoëfficiënt binnen het laboratorium (CV) zijn respectievelijk 5,5% en 8,1% voor THBS1 en 4,3% en 7,2% voor CTSD. De relatieve verschillen tussen laboratorium en laboratorium waren -6,3% voor THBS1 en -3% voor CTSD. Zowel THBS1 als CTSD waren stabiel in serummonsters, met 80-120% terugwinningen van concentraties bij donoren, monstervoorbereiding en opslag. Concluderend zijn de ELISA’s als onderdeel van de nieuwe commerciële in vitro diagnostische check Proclarix geschikt voor gebruik in de klinische praktijk. THBS1 en CTSD kunnen nauwkeurig worden gemeten voor het beoogde gebruik, onafhankelijk van de partij en het laboratorium, wanneer omstandigheden worden gebruikt die constant zijn met de routinepraktijk voor PSA-bemonstering en opslag.
Description: Gentamicin, an orally active aminoglycoside antibiotic, inhibits the growth of both gram-positive and gram-negative bacteria and to inhibit several strains of mycoplasma in tissue culture. Gentamicin inhibits DNase I with an IC50 of 0.57 mM[1][2][3][4].
Description: Gentamicin C1a is the precursor of the semi-synthetic antibiotic Etimicin, and has antibacterial activity. Gentamicin C1a is the major component of the Gentamicin complex[1][2].
Description: Gentamicin sulfate, an orally active aminoglycoside antibiotic, inhibits the growth of both gram-positive and gram-negative bacteria and to inhibit several strains of mycoplasma in tissue culture. Gentamicin sulfate inhibits DNase I with an IC50 of 0.57 mM[1][2][3][4].
Degeneratieve IVD geconditioneerde media en zure pH sensibiliseren sensorische neuronen voor cyclische trekspanning.
Lage rugpijn is een van de belangrijkste oorzaken van handicaps wereldwijd. De omgeving van de degeneratieve tussenwervelschijf (IVD) bevat pathologisch hoge niveaus van inflammatoire cytokines en een zure pH waarvan wordt verondersteld dat ze bijdragen aan rugpijn door nociceptieve neuronen te sensibiliseren voor stimuli die niet pijnlijk zouden zijn bij gezonde patiënten. Onze hypothese was dat de degeneratieve IVD-omgeving discogene pijn veroorzaakt door nociceptieve neuronen te sensibiliseren voor mechanische belasting. Om deze hypothese te testen, hebben we een in vitro mannequin ontwikkeld dat het onderzoek naar interacties tussen de degeneratieve IVD-omgeving, nociceptieve neuronen die de IVD innerveren en mechanischeladen van de schijf; en de identificatie van het onderliggende mechanisme van degeneratieve IVD-geïnduceerde nociceptieve neuronensensibilisatie.
In ons mannequin werden DRG-neuronen van ratten gezaaid op AF-weefsel van runderen, blootgesteld aan degeneratieve IVD-geconditioneerde media en / of zure pH en onderworpen aan cyclische trekspanning (1 Hz; 1-6% spanning) tijdens meting van DRG sensorische neuronactiviteit by way of calcium beeldvorming. Met behulp van dit mannequin hebben we aangetoond dat zowel degeneratieve IVD-geconditioneerde media als degeneratieve IVD-zure pH-waarden verhoogde nociceptieve neuronactivering induceerden als reactie op fysiologische niveaus van mechanische belasting. Bovendien werd aangetoond dat IL-6 degeneratieve IVD-geconditioneerde media-geïnduceerde verhoogde nociceptieve neuronactivering medieert. Deze resultaten tonen aan dat IL-6 degeneratieve IVD medieertveroorzaakte neuronensensibilisatie voor mechanische belasting en vestigt verder IL-6 als een potentieel therapeutisch doelwit voor de behandeling van discogene pijn. Gegevens suggereren verder dat de degeneratieve IVD-omgeving meerdere neuronensensibilisatieroutes (IL-6, pH) bevat die kunnen bijdragen aan discogene pijn. Dit artikel is auteursrechtelijk beschermd. Alle rechten voorbehouden
Snelle detectie van KPC-producerende enterobacteriën die gevoelig zijn voor imipenem / relebactam door gebruik te maken van de MALDI-TOF MS MBT STAR-Carba IVD- check
KPC- producerende Enterobacterales vormen een ernstig probleem voor de volksgezondheid. Er zijn beperkte therapeutische opties beschikbaar voor behandeling, maar de nieuwe combinatie van imipenem / relebactam is een veelbelovend alternatief. Om de werking van deze nieuwe antibioticumcombinatie te behouden, worden alleen gerichte behandelingen aanbevolen en zijn snelle checks om gevoelige bacteriën op te sporen dan ook dringend nodig. Hier stellen we een MALDI-TOF-gebaseerde methode voor met behulp van de MBT STAR-Carba IVD-test, Bruker Daltonik, om KPC-producerende Enterobacterales te detecteren die vatbaar zijn voor imipenem / relebactam in een willekeurige selectie van 143 klinische isolaten die eerder moleculair zijn gekarakteriseerd en die 97 bla KPC bevatten. , 1 bla GES , 12 bla VIM, 4 bla IMP , 3 bla NDM , en 26 bla OXA-48-like . De identificatie van de soort werd bevestigd door MALDI-TOF MS .
De moleculaire karakterisering van de isolaten werd uitgevoerd door de Xpert Carba-R Assay en de resultaten werden gebruikt als gouden standaard. Bovendien werden alle isolaten onderworpen aan imipenem en imipenem / relebactam microdilutie gevoeligheidstesten. De check vertoonde een algehele gevoeligheid en specificiteit voor het detecteren van klasse A-producerende Enterobacterales die gevoelig zijn voor imipenem / relebactam van respectievelijk 98% (96/98) en 93% (42/45) . Deze op MALDI-TOF gebaseerde methodologie, met een doorlooptijd van minder dan 1 uur, is een betrouwbare check voor het detecteren van imipenem / relebactam-activiteit en de opname ervan in routinematige laboratoriumonderzoeken zou het juiste gebruik van deze nieuwe combinatie van antimicrobiële stoffen als een gerichte behandeling vergemakkelijken. .
Een ruggengraat laten groeien – functionele biomaterialen en structuren voor reparatie en regeneratie van tussenwervelschijven ( IVD ): uitdagingen, innovaties en toekomstige richtingen.
Rugpijn en daarmee gepaard gaande kwalen kunnen verantwoordelijk zijn voor een enorm bedrag aan kosten voor de gezondheidszorg en verlies van productiviteit op de werkplek. Met identify verwondingen aan de wervelkolom in de VS treffen elk jaar meer dan 5,7 miljoen mensen. De behandeling van degeneratieve schijfaandoeningen ontstaat bijna altijd als gevolg van een klinische presentatie van pijn en / of ongemak.
Conservatieve behandelingsmodaliteiten die de voorkeur hebben, omvatten het gebruik van niet-steroïde ontstekingsremmende medicijnen, fysiotherapie, therapeutic massage, acupunctuur, chiropractie en voedingssupplementen zoals glucosamine en chondroïtine. Kunstmatige schijfvervanging, ook bekend als totale schijfvervanging, is een behandelingsalternatief voor spinale fusie . Het doel van kunstmatige schijfprothesen is om de normale biomechanica van het wervelsegment na te bootsen, waardoor verdere schade aan aangrenzende secties wordt voorkomen.
Kunstmatige functionele schijfvervanging door middel van permanente metalen en op polymeer gebaseerde componenten blijft evolueren, maar is verre van een samenvatting van de oorspronkelijke schijfstructuur en -functie, en lijdt aan het risico van niet-succesvolle weefselintegratie en apparaatfalen. Strategieën voor weefselengineering en regeneratieve geneeskunde combineren nieuwe materiaalstructuren, bioactieve factoren en stamcellen alleen of in combinatie om de IVD te herstellen en regenereren.
Deze inspanningen bevinden zich in een zeer vroege stadia en een meer diepgaand begrip van het IVD-metabolisme en de cellulaire omgeving zal ook leiden tot een duidelijker begrip van de natuurlijke omgeving die de tissue engineering scaffold zou moeten nabootsen. De huidige assessment concentreert zich op de strategieën voor een succesvolle regeneratieve steiger voor IVD- regeneratie en de behoefte aan het definiëren van nieuwe materialen, omgevingen en factoren die zo fijn zijn afgestemd in de gezonde menselijke tussenwervelschijf in de hoop een dergelijk veel voorkomend degeneratief proces te behandelen.
