Vergelijking van Amsel-criteria, Nugent-score, kweek en twee CE- IVD

Principes en analytische prestaties van Papilloplex® HR-HPV, een nieuwe commerciële CE- IVD moleculaire diagnostische take a look at voor de detectie van hoog-risico HPV-genotypen 

De nauwkeurige detectie en genotypering van hoog-risico humaan papillomavirus (HR-HPV) zijn cruciaal voor screening op baarmoederhalskanker en epidemiologisch onderzoek. GeneFirst Papilloplex® HR-HPV is een nieuwe CE-IVD-gemarkeerde real-time PCR-test op foundation van gepatenteerde multiplex-probe-amplificatietechnologie. Papilloplex® HR-HPV biedt de gelijktijdige detectie en differentiatie van 14 HR-HPV-genotypen (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 en 68a / b) in een enkele reactie met een gesloten buis die snelle, kosteneffectieve en besmettingsvrije resultaten garandeert.

In deze studie werden de analytische prestatiekenmerken in termen van de gevoeligheid, specificiteit, bereik, reproduceerbaarheid en kruisreactiviteit van de take a look at geëvalueerd. Papilloplex® HR-HPV zorgde voor gevoelige detectie en differentiatie van 14 HR-HPV-typen met zeer reproduceerbare resultaten. De differentiële HR-HPV-specificiteit en gevoeligheid werden verder bevestigd door de deelname aan de WHO HPV Laboratory Community Proficiency Examine (2014). Over het algemeen toonde GeneFirst Papilloplex® HR-HPV-assay robuuste analytische prestaties met reproduceerbare en betrouwbare resultaten bij de detectie van HR-HPV-genotypen.

Kwantitatieve eencellige transcriptiebeoordeling van biomarkers ondersteunt cellulaire heterogeniteit in de runder-  IVD .

Ernstige en chronische lage rugpijn wordt vaak geassocieerd met degeneratie van de tussenwervelschijf (IVD). Hoewel IVD-degeneratie wereldwijd een aanzienlijke sociaaleconomische final met zich meebrengt, heeft het ook ernstige gevolgen voor de kwaliteit van leven van de getroffen individuen. Cel gebaseerde regeneratieve geneeskunde benaderingen in klinische research bewogen, maar IVD cel identiteiten in het rijpe disc nog niet volledig opgehelderd en weefsel heterogeniteit bestaat, die een betere karakterisering van IVD cellen. De rundercoccygeale IVD is een geaccepteerd onderzoeksmodel om IVD mechano-biologie en dischomeostase te bestuderen.

Onlangs hebben we nieuwe IVD-biomarkers geïdentificeerd in de buitenste annulus fibrosus (AF) en nucleus pulposus (NP) van de volwassen rundercoccygeale IVD door middel van RNA in situ hybridisatie (AP-RISH) en z-proportietest. Hier volgen we  Lam1 ,  Thy1 ,  Gli1 ,  Gli3 ,  Noto ,  Ptprc ,  Scx ,  Sox2  en  Zscan10 op  met fluorescent RNA in situ hybridisatie (FL-RISH) en confocale microscopie.

Dit maakt subcellulaire transcriptlokalisatie mogelijk en de toevoeging van kwantitatieve eencellige afgeleide waarden van mRNA-expressieniveaus aan onze eerdere analyse. Ten slotte hebben we een benadering voor het modelleren van een Gauss-mengsel gebruikt voor de verkennende analyse van IVD-cellen. Dit werk vormt een aanvulling op onze eerdere op proportie gebaseerde studie van de celpopulatie, bevestigt de eerder voorgestelde biomarkers en duidt op nog meer heterogeniteit van cellen in de buitenste AF en NP van een volwassen IVD.

Vergelijking van Amsel-criteria, Nugent-score, kweek en twee CE- IVD- gemarkeerde kwantitatieve real-time PCR’s met microbiota-analyse voor de diagnose van bacteriële vaginose 

Bacteriële vaginose (BV) is een veel voorkomende gynaecologische aandoening. De diagnose van BV is doorgaans gebaseerd op Amsel-criteria, Nugent-score en / of bacteriecultuur. In deze studie werden deze conventionele methoden en twee CE-IVD-gemarkeerde kwantitatieve real- time (q) PCR-assays vergeleken met microbiota-analyse voor de diagnose van BV. Tachtig vrouwen werden beoordeeld op BV tijdens twee opeenvolgende ziekenhuisbezoeken aan de hand van Amsel-criteria, Nugent-score, cultuur, de AmpliSens® Florocenosis / Bacterial vaginosis-FRT PCR-kit (InterLabService, Moskou, Rusland), en het BD MAX ™ Vaginal Panel (BD Diagnostics, MD, VS). Microbiota-analyse op foundation van amplicon-sequencing van het 16S ribosomale RNA-gen werd gebruikt als referentietest.

Het microbiota-profiel van 36/115 (31%) inclusief gevallen was geassocieerd met BV. Op foundation van microbiota-analyse was de gevoeligheid van het detecteren van BV 38,9% voor kweek, 61,15% voor Amsel-criteria, 63,9% voor Nugent-score en de BD MAX- take a look at, en 80,6% voor de AmpliSens-test, terwijl de specificiteit van alle methoden ≥ 92,four was %. Microbiota-profielen van de gevallen met discrepante resultaten tussen microbiota-analyse en de diagnostische methoden waren variabel .

Alle vijf diagnostische methoden misten BV-positieve gevallen met een relatief hoge abundantie van het geslacht Alloscardovia, Bifidobacterium of Dialister, die door de AmpliSens-test als niet-gespecificeerde dysbiose werden gecategoriseerd. Vergeleken met de Amsel-criteria, de Nugent-score, de kweek en de BD MAX-test, was de AmpliSens-test het meest in overeenstemming met de microbiota-analyse, wat aangeeft dat de AmpliSens-test momenteel de beste beschikbare diagnostische methode is om BV te diagnosticeren in een routinematige klinische setting.

IVD- voorlopercellen: een nieuwe horizon voor het begrijpen van disc-homeostase en -herstel

Degeneratie van de tussenwervelschijf (IVD) wordt geassocieerd met lage rugpijn. Bij IVD’s creëren een hoge mechanische belasting, hoge osmotische druk en hypoxische omstandigheden een vijandige micro-omgeving voor residente cellen. H ow IVD homeostase en functie gehandhaafd onder spanning blijft duidelijk zijn; verschillende onderzoeksgroepen hebben echter gerapporteerd dat ze inheemse endogene progenitor-achtige of anderszins proliferatieve cellen uit de IVD isoleerden.

De isolatie van dergelijke cellen impliceert dat de IVD een rustige progenitor-achtige populatie zou kunnen bevatten die zou kunnen worden geactiveerd voor IVD-reparatie en regeneratie. Een beter begrip van endogene schijfvoorlopercellen zal onze kennis van IVD-homeostase verbeteren en kan, in combinatie met weefselmanipulatietechnieken, veelbelovend zijn voor toekomstige therapeutische toepassingen.

In deze recensie worden de kenmerken van voorlopercellen in verschillende IVD-compartimenten besproken, evenals de potentie van verschillende celpopulaties binnen de IVD. De stamcelkenmerken van deze cellen worden ook vergeleken met die van mesenchymale stromacellen . Op foundation van bestaand bewijs wordt nagegaan of en hoe IVD-degeneratie en de vijandige micro-omgeving de endogene progenitorcelfunctie zouden kunnen beïnvloeden, en er worden manieren voorgesteld om het potentieel van deze cellen voor IVD-herstel te kanaliseren.

Amyloïde bèta-adsorptieprobleem met transferplaten in amyloïde bèta 1-42  IVD- kits

Adsorptie van CSF Aβ1-42 tijdens pre-analytische verwerking wordt voorgesteld als een belangrijke confounder bij testen. Het doel van de huidige studie was om het impact van polypropyleen transferplaten (PTP) in de INNOTEST Aβ1-42 IVD-ELISA-test op Aβ1-42-niveaus te beoordelen. CSF-monsters van 26 personen met subjectieve cognitieve stoornissen (SCI) en 25 patiënten met verdenking op neurodegeneratieve aandoeningen werden getest met behulp van vier verschillende units kits. Aβ1-42-niveaus in alle monsters die op de PTP werden geladen, waren vital lager dan de niveaus in dezelfde monsters die werden geanalyseerd zonder voorafgaande lading op de PTP.

We ontdekten dat de PTP Aβ1-42 kan adsorberen in het bereik van 7 tot 69%. De diagnose bij 20% van de patiënten en de beoordeling van de amyloïdbelasting bij 23% van de SCI-patiënten moesten post-hoc worden aangepast vanwege de aanvankelijke foutieve lage amyloïdespiegels. Het gebruik van een PTP voordat de monsters op de INNOTEST Aβ1-42-testplaat worden geladen, kan resulteren in foutief lage Aβ1-42-niveaus.

Bijdrage van in-vitrodiagnostiek aan effectief gebruik van therapeutische geneesmiddelen – perspectieven uit de IVD- industrie 

De recente ontwikkeling van innovatieve therapeutische geneesmiddelen heeft de relatie tussen diagnostiek en therapeutische geneesmiddelen veranderd. Een van de belangrijkste veranderingen is gepersonaliseerde gezondheidszorg en begeleidende diagnostiek; veel innovatieve geneesmiddelen zoals Herceptin, Alectinib en Atezolizumab zijn ontwikkeld en gelanceerd samen met de bijbehorende begeleidende diagnostiek.

Een ander side van de recente innovatieve geneesmiddelen is het gebruik van hoogwaardige biotechnologie en de ontwikkeling van op antilichamen gebaseerde therapeutische geneesmiddelen . Geneesmiddelen op foundation van antilichamen wekken vaak heterofiele antilichamen op, zoals humaan anti-muis-antilichaam (HAMA). Hiermee rekening houdend, wordt de interferentie van HAMA intensief onderzocht tijdens de ontwikkeling van in-vitrodiagnostiek en wordt deze geëlimineerd door tegenmaatregelen te nemen zoals de toevoeging van quench- eiwitten en het gebruik van gefragmenteerde antilichamen en chimera-antilichamen.

Met deze maatregelen kan de incidentie van interferentie worden teruggebracht tot aanvaardbare niveaus en kunnen de assays betrouwbare resultaten opleveren die bijdragen aan een gunstige therapie. Aan de andere kant leidt de recente ontwikkeling van innovatieve unieke therapeutische geneesmiddelen soms tot interferentie in diagnostische testen, die tijdens de ontwikkeling niet werden verwacht .

Een voorbeeld is de interferentie die wordt waargenomen in de BNP-test die wordt geïnduceerd door een nieuw medicijn voor hartfalen: angiotensinereceptor-neprilysineremmer (ARNI). Wanneer patiënten ARNI gebruiken, nemen de BNP-waarden toe in plaats van de verbeterde toestand van hartfalen. Vanwege deze waarneming wordt meestal NT-proBNP, dat niet wordt beïnvloed door ARNI, gebruikt om het impact van het medicijn te volgen. De kwestie van medicijnresistente bacteriën wordt ook besproken in samenhang met de mogelijke bijdrage van diagnoses aan het effectieve gebruik van antimicrobiële middelen.